一起用心呵护这些“跳动”的细胞HL-1！

细胞简介 HL-1心肌细胞系是一只成年雌性近交系C57BLy 6J小鼠中切除的皮下肿瘤中建立，该小鼠为转染了由心房利钠因子启动子和SV40区域组成的融合基因的转基因小鼠。能够持续分裂和自发收缩，同时保持已分化的心脏表型。HL-1细胞可以连续传代且不会失去其分化的特异性心肌细胞表型，常用于研究正常心肌细胞在信号转导、细胞代谢和转录调控方面的功能，以及体外模拟诸如缺氧、高血糖-高胰岛素血症、细胞凋亡和缺血-再灌注等病理条件。 一、HL-1细胞培养的培养细节介绍 1. 培养基准备 HL-1细胞的生长依赖于特制的培养基，通常由以下成分组成： Claycomb培养基：这是HL-1细胞的标准培养基，需添加10%胎牛血清（FBS）。  (Sigma货号：51800C) 添加剂：包括去甲肾上腺素（0.1 mM）货号： CSP209、L-谷氨酰胺（2 mM）货号：CSP012。 推荐购买中乔新舟完全培养基： 货号 ZM0920。 2. 细胞的培养注意事项 该细胞贴壁性差，培养过程中会有一些圆形细胞。推荐使用Corning的高吸附cellbinding细胞培养瓶（货号：3289）进行细胞培养。或者使用明胶基质CSP132预包被培养瓶，37度孵育至少1小时后去除基质再进行细胞培养，或包被好放入4度备用。 HL-1细胞培养生长至80% 即可传代。细胞消化时间略长，约8-15分钟细胞成纤维样细胞收缩分离脱落即可用完全培养液终止消化即可。 细胞培养过程中，培养基2-3天不进行换液，培养基会变深，变黑的现象，是正常现象。 为确保培养基的新鲜，建议完全培养基避光保存，减少添加剂的降解。 严格无菌操作，避免细菌、真菌或支原体污染。定期检测细胞是否被支原体污染，必要时使用支原体清除试剂处理。 3.细胞复苏 从液氮中取出冻存的HL-1细胞，迅速放入37℃水浴中解冻。(或用干冰盒转移到实验室) 将细胞悬液转移至含预温培养基的离心管中，轻轻混匀。(15ML离心管3ml) 以1000 rpm离心5分钟，弃上清，用新鲜培养基重悬细胞。（T25添加7ml） 将细胞接种于预先涂覆明胶的培养皿中，置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养。 由于该细胞复苏后贴比率差，且形态不好看，我司决定HL-1细胞以冻存管的方式出售。 以下图片是我司客户收到冻存管复苏后第二天细胞图。复苏T25培养瓶后4-5天可进行传代处理。期间可换液一次。(T25瓶7ml培养基)。