RAW264.7如何避免分化,让细胞长得更漂亮
新舟生物
2025-03-20 15:14:00
RAW264.7细胞作为一种经典的小鼠巨噬细胞系,因其易于培养和操作而成为科研工作者的得力助手。然而,RAW264.7细胞在培养过程中容易发生分化,导致细胞形态改变、功能下降,甚至影响实验结果的可靠性。如何让RAW264.7细胞“长得更漂亮”,保持其原始的形态和功能?今天,我们将为您揭秘RAW264.7细胞培养的黄金法则,助您轻松驾驭这一细胞系!
细胞信息
倍增时间:11-30 hours,(生长快速,消耗营养快速,T25瓶建议添加7ml完全培养基,次日进行观察生长速度)。
传代比例:1:4-6
培养体系:DMEM高糖(品牌:中乔新舟 货号:ZQ-100)+10%胎牛血清(中乔新舟 货号:ZQ0500)+1%双抗(中乔新舟 货号:CSP006)
细胞形态:该株巨噬细胞形态上包含松散贴壁的纺锤形和圆形或者立方形的细胞。当细胞密度较大时,细胞会轻微脱落变圆或者许多细胞堆在一起,有些细胞甚至脱落漂浮,这些漂浮的细胞是活的,在传代时应收集起来离心,细胞沉淀可以继续培养。
换液频率:2~3次/周
正确传代方法一
正确的传代方法是 RAW 264.7 细胞培养的关键,每一步操作都要细致入微,稍有不慎细胞就分化了。RAW 264.7 细胞不能用胰酶消化,胰酶消化传代反而更容易分化。我司培养 RAW 264.7 细胞是十余年,摸索出一个刮刀传代的方法,此方法操作简单,能更好地控制细胞分化率。为了更加直观学习传代步骤,我们用视频进行讲解,方便大家更好把控传代步骤:
出入视频
正确传代方法二
当您没有准备刮刀时,我司建议您按照以下操作步骤进行传代,减少细胞的分化。
细胞密度达到80%。用手掌心拍打瓶尾部,观察细胞脱落情况。
拍打过程中有50-80%的细胞会脱落。此时收集脱落细胞。
按照1:4-6的比例传代,并补充新鲜完全培养基。T25瓶7ml完全培养基。
(切记用枪头吹打或巴氏吸管吹打,由于每个人吹打力度不同,吹打次数不同,传代3-5次后会造成很多不可控因素导致细胞分化)。
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