特价细胞之PC-12
新舟生物
2024-12-07 16:02:26
Hey小伙伴们，今天来聊聊如何复苏那些高冷的PC-12细胞。🧬
🔬 PC-12细胞小科普： PC-12细胞是一种神经内分泌细胞系，它们在高分化状态下长得像梭形，突起细长，就像神经元的轴突一样。
🧊 冻管细胞复苏步骤：
准备阶段：
从液氮罐中取出细胞，小心放入干冰中，快速转移到细胞房。
提前准备好完全培养基和离心管。
快速解冻：
将冻管细胞放入37°C水浴中迅速解冻，大约1-2分钟。
记得保持冻管瓶盖在水浴液面之上，减少污染风险。
消毒与转移：
一旦大部分内容物解冻，立即将冻管移出水浴，用70%乙醇消毒冻管外壁。
将内容物转移到含有3-6mL完全培养基的离心管中，轻轻混匀。
离心与计数：
离心（125%，3-5分钟）1000-1200rpm，去除培养基，细胞沉淀用手指弹松。
添加3ml完全培养基混匀细胞并进行计数。
调整密度与培养：
用适量完全培养基将细胞密度调整至0.6-2.0x10^6 cells/mL。
转移至培养瓶中，建议T25培养瓶添加5-7ml完全培养基。
培养箱中静置培养，等待细胞密度达到80%以上时进行传代。
🌱 小贴士：
复苏细胞时，动作要快，避免细胞受到热损伤。
保持无菌操作，避免污染。
观察细胞生长情况，及时传代，保持细胞活力。
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