菌种扩大培养的目的是什么

2024-02-29 00:00:00

用于发酵过程作为活细胞催化剂的微生物,包括细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类。来源于自然界大量的微生物,从中经分离并筛选出有用菌种,再加以改良,贮存待用于生产。

菌种扩大培养的目的是提供足够菌种。发酵时间的长短和接种量的大小有关,接种量大,发酵时间则短。将较多数量的成熟菌体接入发酵罐中,就有利于缩短发酵时间,提高发酵罐的利用率,并且也有利于减少染菌的机会。因此,种子扩大培养的任务,不但要得到纯而壮的菌体,而且要获得活力旺盛的、接种数量足够的菌体。

菌种保存的方法

1、斜面低温保藏法

(1)将菌种接种到适合的固体斜面培养基上,等到菌种充分生长过后,使用油纸将棉塞部分包扎好,然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存。

(2)如果是霉菌、放线菌及有芽孢的细菌,一般可以保存2-4个月左右,需要移种一次。如果是酵母菌,一般可以保存2个月左右,需要每个月移种一次。

2、液体石蜡覆盖保藏法

(1)将液体石蜡装在三角烧瓶中,并使用棉塞塞好,用牛皮纸进行包扎,然后在0.1MPa,121.3℃的环境下灭菌30分钟左右,接着将其放置在40℃的温箱之中,将水汽蒸发掉。

(2)将需要保藏的菌种,用适合的斜面培养基进行培养,得到健壮的孢子或者是菌体。

(3)使用灭菌过的吸管将液体石蜡吸出,注入斜面上,用量为高出斜面顶端1cm左右为宜。

(4)将试管直立,放置在低温或者是室温之下进行保存。

(5)霉菌、放线菌、芽孢细菌可以保藏2年以上不死,酵母菌可以保藏1-2年,一般无芽孢细菌可以保藏1年,脑膜炎球菌可以保藏3个月左右(37℃环境下)。

3、沙土保藏法

(1)准备好河沙,加入10%稀盐酸,然后加热煮沸30分钟左右,将里面的有机质去掉,然后将酸水倒掉,用自来冲洗至ph为中性,接着烘干,过筛(40目筛子),去掉粗颗粒。

(2)准备好非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土,浸泡洗涤数次,直至ph为中性,然后烘干,碾碎,过筛(100目筛子),去掉粗颗粒。

(3)将沙和土按照2:1的比例混合,装入试管或者是安瓿管中,塞好棉塞,在1212℃的环境下灭菌30分钟左右。

(4)将菌种在斜面培养基中培养,得到健壮的菌体,然后向斜面培养物中注入3-5ml无菌水,洗下细胞或孢子制成菌悬液。

(5)使用灭菌过的吸管吸取菌悬液,然后均匀滴入沙土管中(0.2-0.5ml/管)。如果是放线菌或霉菌,可以直接挑取孢子拌入沙土管中。

(6)真空抽去沙土管中的水分。

(7)将沙土管用火焰熔封,然后存放在低温(4-6℃)干燥处保藏,或者是将沙土管用牛皮纸或塑料纸包好,放置在干燥器内保存。保存期间,每隔6个月左右检查一次菌种存活性。