松鼠一般以草食性为主，食物主要是种子和果仁，也会吃鸟蛋、水果如樱桃等。部分物种会食昆虫，其中一些热带物种更会为捕食昆虫而进行迁徒，甚至叼走山雀雏鸟。

松鼠多在春、夏季发情，发情期大约为两个星期左右。松鼠繁殖的适龄期，雌性为8到9周龄，雄鼠为9到10周龄。在非繁殖季节，雌雄性成体分别占据一定的地方作为自己生活的活动范围。在野外，雌性保护一定面积的地盘是为了保护食物，其内不允许其他同种个体进入，对雄性个体也是如此。但是在繁殖季节，则明显地放鬆对领域范围的保护，允许雄性个体进入。

松鼠怀孕的时间大约为35到40天，每年能产3胎左右，每次能产4到6只。初生松鼠体形很小，看不见东西，以母体乳汁作为全部营养需求的来源。松鼠发育很慢，生下将近30天时才睁开眼睛。至一个半月时，小松鼠才愿意到室外进行活动。