在2023年欧洲肝脏大会上（EASL2023），美国临床阶段生物制药公司（Aligos Therapeutics）带来了HBV siRNA PD-L1抑制剂开发最新的临床前研究进展。
该研究指一种强效的人类PD-L1 siRNA导致人类PD-1/PD-L1双敲小鼠通过免疫激活途径显著减少AAV-HBV感染的肝细胞（siRNA PD-L1抑制剂）。研究人员介绍，T细胞衰竭是慢性乙型肝炎（CHB）的特征，也是乙型肝炎病毒（HBV）感染持续存在的原因之一。
PD-1/PD-L1是介导慢性乙型肝炎患者T细胞衰竭的主要共抑制轴。靶向PD-1或PD-L1的单克隆抗体已经在慢性乙型肝炎患者中进行了测试，并显示出有希望的结果。然而，为尽量减少与免疫相关的不良反应，CHB患者使用的抗体剂量明显低于癌症患者。与抗体相比，皮下(SC)递送的siRNA在血浆中的半衰期短，暴露主要集中在肝脏，从而降低了全身毒性的可能性。
研究人员已开发了一种GalNAc共轭的人 PD-L1 (hPD-L1) siRNA 先导分子ALG-072585，它在人 PD-1/PD-L1 双基因敲入 (KI) 小鼠中通过免疫激活显著减少了AAV-HBV感染的肝细胞，同时在相同背景的未感染小鼠中未显示出肝毒性迹象。
在本研究中siRNA由MerMade合成器合成。采用RT- qPCR方法评价人PD-L1在SNU-387细胞系中的体外敲除效果。GalNAc PD-L1 siRNA的药效学 (PD) 研究是通过评估双 KI 小鼠体内 Poly IC 诱导的人类 PD-L1 水平来进行的。在慢性感染 AAV-HBV 的双 KI 小鼠中，ALG-072585 及其亲本 siRNA ALG-072571 作为单药（QW 或 QOW）或与 HBV siRNA ALG-125819联用进行SC给药。
对采集的连续血清进行HBsAg、HBeAg、HBVDNA和ALT检测。对最终血清样本进行抗HBsAg抗体检测。使用免疫组织化学（IHC）对小鼠肝脏进行HBcAg、HBsAg和CD3染色，并对阳性细胞进行评分。
结果表明，hPD-L1 在 HBV 感染的3D肝脏芯片和 AAV-HBV 感染的 hPD-1/hPD-L1 双 KI 小鼠肝脏中升高；亲本hPD-L1 siRNA ALG-072571可以降低poly(I:C)处理的hPD-1/hPD-L1双KI小鼠肝脏中的hPD-L1含量；在AAV-HBV双 KI 小鼠中，ALG-072571作为单药可使血清HBsAg、HBeAg和HBVDNA分别降低 3.3 log10 IU/mL、1.73 log10 PEIU/mL 和 4.5 log10 IU/mL；与HBV siRNA联合使用时，可使血清HBsAg、HBeAg和HBVDNA分别降低 4.3 log10 IU/mL、2.0 log10 PEIU/mL 和 6.9 log10 IU/mL；
通过化学脱稳技术处理对ALG-072571进行优化，得到的ALG-072585在体内保留了其亲本在降低感染的肝细胞和血清HBsAg的效力，但在未感染的双KI小鼠中不诱导ALT；在AAV-HBV感染的双KI小鼠中，ALG-072585增加了肝脏中的T细胞浸润，并诱导了血液中的抗HBsAg抗体。
小番健康结语：包括今天介绍的HBV siRNA PD-L1抑制剂临床前开发最新进展，Aligos公司HBV管道中的新机制候选药物还是比较丰富的，且化学结构新颖。在本届欧肝会中，Aligos公司一共介绍了5项与乙肝创新药开发有关的最新研究进展，最近都已经向各位读者介绍了。
简单回顾一下，Aligos公司现有处于临床开发阶段的（都在第1期）有HBV衣壳组装调节剂（CAMs）ALG-000184和GalNAc结合的小干扰RNA ALG-125755。ALG-000184算是在同类靶点中临床开发数据相对积极的一种候选药物，之前介绍了是24周数据，还有一份28周最新数据，后续会介绍，它属于E类的CAMs。
最近两年来，开发HBV siRNA分子的制药公司越来越多，本届欧肝会中，Aligos公司带来了两项与ALG-125755相关的研究进展，一项是单药调降乙肝表面抗原的积极数据，另一项是进一步阐明它的作用机理。
值得一提的是，Aligos公司管道内正处于临床前阶段HBV化合物，包括今天介绍的siRNA PD-L1抑制剂ALG-072571，与前几天介绍的肝脏靶向PD-L1小分子抑制剂ALG-093702。后续会带来本届欧肝会期间，Aligos公司对这些乙肝候选药物进展的点评。
