ABI-4334，是一种处于临床前阶段由临床阶段生物技术公司（Assembly Biosciences）开发的乙肝新药。在2022年美国肝病学会年会（AASLD2022）前夕，研究人员在临床前开发中分析并验证了 ABI-4334 新颖作用机制。

乙肝在研新药ABI-4334，通过多途径，加速衣壳组装抑制cccDNA形成

本研究指，ABI-4334，一种新型乙肝病毒核心抑制剂，可通过多种途径加速衣壳组装并抑制 cccDNA 的形成。研究人员介绍，核心抑制剂（CIs）是一类新型的HBV抗病毒药物，具有提高慢性HBV感染患者治愈率的潜力。

由于 HBV 核心蛋白的多功能作用，CIs 影响着HBV复制周期的多个步骤，包括：（1）从乙肝病毒进入的共价闭合环状DNA（cccDNA）形成，（2）新的衣壳形成和前基因组RNA（pgRNA）的包被，和 （3）cccDNA的细胞内扩增。

研究人员假设了一种对以上三种途径都有活性的高效力 CI 将使临床效果最大化。在本届美肝会，展示了一种新型的 CI，即ABI-4334（4334），它通过两种途径在体外对 cccDNA 的形成具有强大活性，并且还能够破坏进入的含有双链线性DNA（DL-DNA）的衣壳。

通过感染的原代人肝细胞（PHH），使用 4334 处理 3 小时（细胞质衣壳DNA终点）或 4 天（细胞核cccDNA终点），并通过 Southern blot 检测HBVDNA，来测试对 cccDNA 形成的抑制作用。对于 4344 的传入 DL-DNA 效应，转染HepG2-NTCP细胞，并使用 4334 处理 3 小时，随后对细胞裂解液进行核酸酶处理，使用 Southern blot 检测 HBVDNA。

通过诱导 HepAD38 细胞，用膦甲酸（foscarnet）来延缓DNA合成 4 天，然后用 4334 处理 3天，再用 Southern blot 检测方法评估 4334 通过细胞内扩增复制对 cccDNA 形成的影响。通过对诱导和经 4334 处理过的 HepAD38 细胞的核心蛋白，进行速度沉降与天然凝胶分析 4334 的衣壳组装效果。

研究结果表明，4334较早地破坏了进入衣壳，并阻止了感染的 PHHs 中 cccDNA 的形成，EC50为 3.1 nM。此外，4334 在受感染的 HepG2- NTCP 细胞中破坏了含有 DL-DNA 的衣壳，尽管与松弛的环状DNA（RC-DNA）衣壳破坏相比，其浓度要高 5-10 倍。

在人类预测的血浆Cmin中，4334通过细胞内扩增显著抑制 cccDNA 的形成。对衣壳形成的分析表明，4334加速了衣壳的组装，但阻断了 pgRNA 的包装，并在衣壳中诱导了细微的结构变化，从而改变了其固有的凝胶流动能力。

研究结论：在本届美肝会前夕，研究人员介绍，4334是一种强效的核心抑制剂，能够通过进入的衣壳和细胞内扩增抑制cccDNA的形成。在HBV感染的早期阶段，4334能较早地破坏含有 RC-DNA 和 DL-DNA 的衣壳。计划在2022年下半年，把 4334 推进至 1a 期首次人体试验。

小番健康结语：这是在本届美肝会前夕，Assembly Bio管道内另一款在研乙肝新药最新进展。本届美肝会，暂时只关注到Assembly Bio提交的两款在研乙肝新药最新试验进展，分别是昨天介绍开发以全口服HBV/HDV进入抑制剂，以及今天介绍的 ABI-4334，它们都处在临床前阶段，但 ABI-4334 是一款即将启动1期试验的乙肝新药，口服HBV/HDV进入抑制剂尚未提名候选药物。