质粒抽提注意事项 1.菌液量太大。裂解不彻底，延长裂解时间也没有用，中和后还是粘乎一团，最后得率极低。 2. 裂解时间过长。一般推荐5min。 3. 虽然说明书都标注裂解和中和不要剧烈摇晃。但是适当多晃几次，彻底混匀很重要。 3. 用传统的异丙纯沉淀，酒精清洗这种方法，质粒的得率和质量会更高。 4. 抽提高质量质粒，会让后续转染实验更稳定，事半功倍。推荐进口MN质粒大抽和小抽试剂盒，真正的慢工出细活，虽然花的时间相比较国产试剂盒会多一些，但考虑到质粒抽提还只是细胞动物实验的第一步，后续质粒转染收样，qpcr、WB以以及各种功能实验验证等需要更多的时间，而且抽一次可以用很久，本人觉得质粒抽提所花费的时间不值得一提。而且，抽的量非常大，相比较于国产，均价更低。 如果出现细胞质粒转染效率偏低，除转染试剂原因外，非常有必要检测下质粒质量，Nano测出来的数值可能虚高，具体可以跑DNA胶验证下条带和浓度。