大学生如何变自律
原代细胞提取tips(医学生经验总结篇)
组织提取原代细胞培养protocol:
1.取出组织,放入准备好的带有无菌培养基的EP管内。
2.用含100U/ml青霉素和链霉素的PBS溶液,漂洗2-3次,
直到漂洗液清亮透明为止。
(不要用枪吹吸组织,泡一会,1min左右或者用镊子夹着摇晃即可)
3.组织块基本上无血块,用剪刀将其剪碎成约1-3mm3大小(偏圆润)的组织块。
4.再次用pbs来回清洗2到3次,直到透明
5.清洗完成后,将其需要的适量组织块转移到新的15ml离心管内
6.加入0.25%的胰蛋白酶或1%的胶原蛋白酶与组织=1:1
7.将其放入37℃恒温水浴箱或者摇床
(水浴箱内,我们要不断的摇晃充分)
完成后道路过滤塞内留下所要液体,放入其离心机内,
1000转五分钟, 完成后去掉其上清液,
1-2mL加入含15%胎牛血清的DMEM培养基,
使细胞接触到培养基。(组织飘起来没关系,注意静置培养)
9.来回吹打取出一粒,在玻片上放于倒置显微镜下观察
请问一下1%的胶原酶是怎么配置?1%怎么换算单位?