原代细胞提起tips|总结篇

一学小亦人 2024-07-25 00:02:19
大学生如何变自律 原代细胞提取tips(医学生经验总结篇) 组织提取原代细胞培养protocol: 1.取出组织,放入准备好的带有无菌培养基的EP管内。 2.用含100U/ml青霉素和链霉素的PBS溶液,漂洗2-3次, 直到漂洗液清亮透明为止。 (不要用枪吹吸组织,泡一会,1min左右或者用镊子夹着摇晃即可) 3.组织块基本上无血块,用剪刀将其剪碎成约1-3mm3大小(偏圆润)的组织块。 4.再次用pbs来回清洗2到3次,直到透明 5.清洗完成后,将其需要的适量组织块转移到新的15ml离心管内 6.加入0.25%的胰蛋白酶或1%的胶原蛋白酶与组织=1:1 7.将其放入37℃恒温水浴箱或者摇床 (水浴箱内,我们要不断的摇晃充分) 完成后道路过滤塞内留下所要液体,放入其离心机内, 1000转五分钟, 完成后去掉其上清液, 1-2mL加入含15%胎牛血清的DMEM培养基, 使细胞接触到培养基。(组织飘起来没关系,注意静置培养) 9.来回吹打取出一粒,在玻片上放于倒置显微镜下观察
0 阅读:0
评论列表
  • 2024-07-26 21:58

    请问一下1%的胶原酶是怎么配置?1%怎么换算单位?