[哇R]虽然有的生物公司可以直接买质粒，但是有时没有现成质粒，或者导师强制要求的时候可能还是要自己构建质粒。今天师兄来教大家如何构建过表达质粒。 [一R]从NCBI获取质粒的CDS序列(就是编码蛋白质的区域) [二R]选择酶切位点，设计PCR引物 [三R]通过PCR把需要的序列前后加上酶切位点给扩增出来(俗称P质粒) [四R]产物纯化，酶切酶连 [五R]转化，摇菌，测序鉴定。 [微笑R]测序公司擎科生物非常方便，每天都上门取样，样品放在指定位置就有工作人员自己来拿走，超级方便!而且结果出得很快，PCR产物或者质粒测序9小时出结果，菌液测序也不到一天。