师兄带你搞定Lipo3000转染质粒/siRNA步骤

做科研的小飞博士 2024-07-14 00:21:01
转染步骤: ① Opti-MEM + Lipo3000 ② Opti-MEM + 质粒或siRNA + P3000(转染质粒时需要,转染siRNA时不需要) 把②加入①,混匀,室温孵育10-15分钟,加入培养的细胞中,1-3天后收样提RNA或蛋白。 注意事项: 1. 细胞密度:转染时细胞密度约70-90%,有助于平衡毒性和转染效率。 2. 培养基稀释:使用无血清的培养基,比如Opti-MEM稀释Lipo3000和P3000。 3. 质粒的siRNA区别:在稀释siRNA时,不需要加入P3000。但是转染质粒时需要。 4. 转染效率的优化:根据实验结果优化转染条件,比如在细胞密度的控制、siRNA或质粒的使用量等。 5. Lipo3000不能冷冻!不能冷冻!不能冷冻! 🙋抓住618的尾巴给爸妈买了这个红凯撒鱼油,因为忙学业和实验室的原因,没能经常回家😔,但是每次tj报告我都很关注他们的🈯️标情况,上次老爸老妈就查出来血脂几个指标超标了一些,考虑到没有超出特别多,同时他汀💊物的一些副作用后,我选择了用营养品帮他们调整。 👉就是这个红凯撒鱼油,主要的成分有红曲米、鱼油、辅酶Q10和橄榄多酚,鱼油可以补充营养,同时里面的EPA可以针对甘油三酯,红曲米提取的莫纳克林k可以针对总胆固醇和低密度脂蛋白,辅酶Q10可以保护心肌。这个红曲米是通过检测的,所以不用担心。 之前买的已经吃完了,爸妈说蛮好的,不会像之前那样觉得头😵‍💫😵‍💫的,所以吃完趁着618有活动,我又给他们囤了,如果有同款经常感到头😵‍💫、🈯️标超标的爸妈可以试试
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