那些只有师兄才会告诉你的cck8技巧!

做科研的小飞博士 2024-07-12 00:12:13
🔬 CCK8是一个常见的实验,无论是测细胞增殖速度,还是测药物的IC50,都少不了测CCK8。但是CCK8的结果仿佛非常不稳定,复孔差距大,趋势奇奇怪怪。师兄今天就来总结一下CCK8的技巧。 1⃣ 铺板时,根据你培养时间的长短和细胞生长的速度决定接种的细胞数,而不是认死一个数值。细胞长得快,培养时间长,就应该少种细胞,不要在测的过程中有些孔已经长满了。 2⃣ 除了对照组之外,记得设置一个不含细胞的空培养基孔! 3⃣ 铺板均匀的方法:96孔板不需要润板,直接加100ul细胞悬液,体积不要太小,也不要先加50ul培养基再加50ul细胞悬液。在制备细胞悬液的过程中,需要多次轻柔吹打,确保细胞悬液均匀混合,减少细胞团块的形成。 4⃣ 有两种添加CCK-8的方法: ① 直接向每个孔中加入10微升的CCK-8原液。缺点:10微升的CCK-8量较少,可能会因粘附在孔壁上而产生误差。 ② 配制含有10% CCK-8的培养基,并通过换液的方式添加。但是注意防止产生气泡,可以用负压吸引器或者注射器吸走培养基,也可以用大枪头套小枪头。加的时候也要注意不要产生气泡,也不要对着底部直接打出液体。 5⃣ 反应时间:1-4小时内都可以测量。如果是每天测一次作增殖曲线,记得每天都处理相同时间。 6⃣ 种板时可以多设置一些复孔,比如5个以上。这样可以增加实验的可靠性。 ⭕最近实验忙,师弟拿给我Primalg鱼油,说Primalg鱼油含有omega-3和维生素B族。研究了下发现,Primalg鱼油是一款源自北欧挪威的膳食营养补充剂,Omega-3 鱼油成分生产符合挪威和欧洲安全要求。三粒所含的omega-3足足有1800mg!而且他家鱼油还添加了123mg神经递质胆碱,是构成神经递质乙酰胆碱的原材料,可以促进大脑发育,改善记忆力!非常适合重🧠力劳动者,改善记忆力,补充大🧠恢复必须的营养
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