Western Blot是一种用于检测特定蛋白质在样本中的表达水平的技术。在这个过程中，聚偏氟乙烯（PVDF）膜因其稳定性和蛋白质结合能力而被广泛用作转移介质，即将蛋白质从凝胶转移到膜上进行检测。 🧬PVDF膜的孔径大小是其关键特性之一，0.22和0.45μm的膜指的是膜上孔径的大小。以下是两者之间的主要区别： 1⃣ 孔径大小： 0.22𝜇𝑚膜：具有较小的孔径，这使得膜在蛋白质转移过程中具有更高的结合能力，特别是对较小的蛋白质。较小的孔径有助于减少蛋白质在膜上的扩散，从而提高转移的分辨率。 0.45𝜇𝑚膜：孔径较大，适合转移较大的蛋白质，因为较大的孔隙可以减少大分子在膜上的堵塞。 2⃣ 蛋白质结合能力： 0.22𝜇𝑚膜：由于孔径较小，膜的表面更不规则，这增加了与蛋白质的接触面积，从而提高了蛋白质的结合能力。 0.45𝜇𝑚膜：较大的孔径可能导致膜表面相对光滑，与蛋白质的结合能力可能略低于0.22𝜇𝑚膜。 3⃣ 分辨率： 0.22𝜇𝑚膜：提供更高的分辨率，适合检测蛋白质大小相近的多个条带，或进行精细的蛋白质定量分析。 0.45𝜇𝑚膜：分辨率相对较低，但在转移大分子量蛋白质时可能更为有效。 [草莓R]根据目标蛋白质的大小选择合适的孔径，一般而言0.2𝜇𝑚PVDF膜适合20KD以下的小分子蛋白，而0.45𝜇𝑚 PVDF膜适合20KD以上的大分子蛋白。 🔬PVDF膜使用注意事项： 1⃣ 甲醇激活：使用前用甲醇浸泡。甲醇能够使PVDF膜的表面活化，增加膜的疏水性，从而提高其对蛋白质的结合能力。 2⃣ 避免干燥：激活膜后、转膜过程中以及转膜结束后，都要快速在液体间转移膜，避免膜在空气中干燥，影响后续曝光。 3⃣ 避免直接接触：应避免直接用手接触膜表面，以防止油脂和蛋白质污染，影响转膜效率并产生背景污斑。全程应使用镊子操作膜，以减少污染和物理损伤。 4⃣ 排尽气泡：在进行电转印时，需要确保凝胶和PVDF膜之间没有气泡，因为气泡会影响蛋白质的均匀转移。 [赞R]最近科研压力大，睡不着，师弟分享的文斯可安睡片很惊喜，仔细看了成分发现里有食品级褪黑素和灵芝成分，茶氨酸帮助身体和精神得到舒缓、酸枣仁缓解焦虑情绪，睡眠+情绪起调节挺不错的，我一般是睡前半小时来两粒。睡眠好了真的精力好多了！