在2022年的美国肝病学会年会（AASLD2022）前夕，在一项研究中，研究人员描述了一种新策略，即PD-L1抑制剂：siRNA。该新策略将由美国临床阶段生物制药公司（Aligos Therapeutics）继续推进。

乙肝2022美肝会，肝靶向siRNA抑制PD-L1表达，可潜在恢复免疫反应

本研究指，使用一种新的肝脏靶向 siRNA 抑制 PD-L1的表达，可导致抗HBV免疫反应的潜在恢复。研究人员介绍，慢性乙肝（CHB）患者中的乙肝病毒持续感染与HBV特异性T细胞反应削弱有关。T细胞中程序性细胞死亡蛋白1（PD-1）的上调以及肝细胞中程序性细胞死亡配体1（PD-L1）的上调，被认为是一个主要原因。

因此，抑制PD-L1的表达可能有助于恢复免疫反应，并引发免疫介导的对HBV感染的肝细胞的清除，这对于慢性乙肝的治愈至关重要。研究人员表示，我们开发了一种小干扰RNA（siRNA）平台技术，采用新型稳定化学方法，并将其应用于HBV和PD-L1 siRNA的药物开发。

研究人员设计了靶向小鼠和人类PD-L1之间高度保守区域的siRNA，并在MerMade合成仪上，合成了带有或不带有 N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）结合的siRNA。采用 RT-qPCR 方法对SNU-387细胞系中PD-L1的体外敲除进行了评估。

采用 Poly IC 诱导的PD-L1在 C57BL/6小鼠中的表达来研究其药效学（PD），这种 GalNAc-siRNAs 被以皮下注射方式进行给药（SC）。在治疗后，采集小鼠肝脏和肾脏，并通过 RT-qPCR检测法评估了 PD-L1 mRNA的表达。在一项使用相同小鼠的 AAV-HBV小鼠研究中，通过皮下注射每周5次给药GalNAc-siRNA，每周评估血清HBsAg/HBeAg/HBVDNA和ALT。

本研究中，使用基于 SNU-387 细胞试验，发现了多个具有亚纳摩尔级（sub-nanomolar）PD-L1 mRNA 抑制 EC50值的siRNA。PD研究结果表明，4个带有GalNAc结合的siRNA，在小鼠肝脏中对PD-L1表达的抑制作用为 39.3%至61.7%，对肾脏中PD-L1表达的抑制作用较弱。

此外，研究人员观察到，反义链上有5'磷酸盐模拟修饰的siRNAs实现了更大的抑制。在概念验证的AAV-HBV小鼠研究中，在每周服用5次7.5毫克/千克的剂量后，一种带有GalNAc结合但没有5'磷酸盐模拟修饰的先导化合物在肝脏中抑制PD-L1表达达 45.7%，显示出乙肝表面抗原（HBsAg）最大下降 0.9 log10 (IU/mL)。目前，研究人员正在努力寻找具有更高PD-L1表达阻断效率和更高抗HBV活性的siRNA。

研究结论：本研究人员认为，肝脏靶向PD-L1的siRNA创新疗法，可能导致对HBV免疫反应的恢复，从而清除HBV感染。

小番健康结语：简单地讲，研究人员设想开发一种新型siRNA，它是具有肝靶向特点，并抑制PD-L1的表达，从而导致对HBV免疫应答的恢复。我们也可以将这种疗法，称为肝靶向PD-L1的siRNA疗法，今后也将开发用于潜在帮助慢乙肝恢复自身免疫反应，进而清除HBV感染，期望实现功能性治愈HBV。

在本临床前研究中，研究人员已经发现了多个具有亚纳摩尔级 PD-L1 mRNA抑制EC50值的siRNA，正努力确定更大PD-L1表达阻断率和更大抗HBV活性的siRNA分子。该创新疗法由Aligos公司科学家发现及将开发，发布在2022年美肝会上。目前，基于该创新机制还未提名候选药物，尚处于临床前。